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13 篇文章
蛋白原核表达纯化验证
一.原核诱导表达原理一旦由lacI细胞所形成的阻遏蛋白与lac操纵子融合后,就无法影响外部基因的转录和表达了,也就从而保证了宿主细胞的健康生长。IPTG同时也是一种可以与乳糖水解融合的中间物质,它虽然无法被细胞
2023.08.09
原核表达实验过程中常见的问题
原核表达是指利用基因克隆技术,通过构建到表达载体将外源目的基因转化至宿主细胞中,使其在原核生物体内稳定表达,从而获得大量目的蛋白的方法。通过查阅相关文献资料,本文汇总了原核表达实验过程中常见的问题,分析了可能存
2023.08.02
酵母表达载体介绍
毕赤酵母表达系统中常用的表达载体包括分泌表达载体和非分泌型表达载体。因此可以根据基因表达的目的选择合适的酵母表达载体。分泌型表达载体主要有pPIC9,pPIC9k,pHIL-S1,pPICZa,pYAM75P6
2023.07.13
CRISPR/Cas9敲除细胞系构建
1.什么是CRISPR/Cas9敲除细胞系CRISPR/Cas9(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是新出现的一种由sgRNA指导Cas核
2023.06.25
永生化细胞系构建
1.什么是细胞永生化细胞永生化是指细胞在体外培养的过程中,由于自身基因变化或者是外界各种刺激条件,避免的正常传代细胞衰老死亡的过程,以至于可以长期传代培养、无限分裂增殖。2.细胞永生化的意义(1)能获得大量的细
2023.05.23
一文读懂原核蛋白表达
1.原核表达概念蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。原核蛋白表达是指通过基因克隆技术,将外源目的基因,通过构建表达载体并导入表达菌株的方法,使其在特定原
2023.05.16
噬菌体展示文库构建全流程
1.什么是噬菌体展示噬菌体文库是用于基因克隆的噬菌体载体,噬菌体展示文库是将外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合,展示在噬菌体表面并保持特定的空间构象,利用特异性亲和作用以筛选特异性蛋白或多肽的一项新技术。2.噬
2023.05.05
纳米抗体制备流程详解
1.什么是纳米抗体纳米抗体是由比利时科学家于1993年在自然杂志中首次报道。传统抗体分子(IgG)是由两条相同的重链和两条相同的轻链组成的结构比较保守的抗体分子。抗体分子的轻链包含1个VL区和1个CL区,而重链
2023.04.18
贝伐珠单抗的单链抗体有肿瘤治疗的潜力?
血管内皮生长因子(VEGF)是一种已知参与许多生理和病理事件的自身糖蛋白。该分子是用于癌症治疗的抗血管生成的主要靶标。第一个针对促血管生成因子的治疗产品是一种人源化的抗VEGFmAb,称为贝伐珠单抗。1.概述研
2023.02.28
【Nature】柯萨奇病毒A16抗体中和的分子机制
柯萨奇病毒A16(CVA16)是小核糖核酸病毒科肠道病毒属的成员,是婴幼儿中流行的手足口病(HFMD)的主要病原体之一。CVA16感染可能导致自限性疾病以及严重的临床结果,例如脑炎、心肌炎、肺炎,甚至死亡。此外
2023.01.17
细胞划痕实验介绍
一、实验原理细胞划痕(woundhealing)法是简捷测定细胞迁移远动和修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分
2022.12.08
单克隆抗体和多克隆抗体的区别
单克隆抗体和多克隆抗体的区别一、单克隆抗体(一)单克隆抗体单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术
2022.11.24
重组蛋白的常见问题汇总
1.蛋白为什么要冻干?冻干对蛋白的影响有哪些?蛋白质对热敏感,冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来,提高蛋白的稳定性并延长保存时间,同时降低运费。2.冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂?一般冻干保护剂有哪几种?保
2022.11.03

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