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ACA肾上腺皮质抗体ELISA试剂盒核心与原理
2025.11.05   点击60次

试剂盒基本信息

检测目标:肾上腺皮质抗体(ACA),主要应用于自身免疫性肾上腺疾病(如 Addison 病)的辅助诊断与研究。

检测样本:血清、血浆、细胞培养上清等生物液体。

规格型号:常见48T(可检测48个样本)和96T(可检测96个样本)两种规格,部分品牌提供进口分装或原装产品。

保存条件:2-8℃冷藏保存,部分试剂长期不用需-20℃冷冻;使用前需室温平衡15-30分钟。

核心操作流程

样本预处理

血清/血浆需3000转离心10分钟分离,避免溶血或反复冻融。

组织匀浆需按说明书比例加生理盐水研磨后离心取上清。

实验步骤

加样:将标准品、样本依次加入预包被板孔,37℃温育30-60分钟。

洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液注满孔板静置2分钟,重复3-6次,拍干残留液体(关键步骤,需避免交叉污染)。

显色:加入酶标记抗体和底物TMB,37℃避光反应15-30分钟,至蓝色明显梯度出现。

终止:加入硫酸终止液,溶液变黄后15分钟内用酶标仪在450nm波长读数。

⚠️ 关键注意事项

试剂准备:浓缩洗涤液若有结晶,需水浴加热溶解;底物需严格避光保存。

操作规范:

加样时使用校准过的移液枪,每孔加样时间控制在5分钟内。

洗板需确保每孔注满洗液,洗板机针头需通畅,手工洗板避免交叉污染。

建议做双孔实验以减少误差,标准曲线需每次实验同步绘制。

安全提示:终止液具有腐蚀性,操作时需戴手套;所有废液按生物危害物处理。

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