神经调节素1亚型HRGβ1ELISA试剂盒操作步骤

终止反应与读数
反应完成后，每孔加入50μL终止液（Stop Solution），轻轻混匀，溶液由蓝色转为黄色，表明反应终止。注意避免产生气泡，以免影响吸光度检测。立即使用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值（参考波长630nm可校正孔板边缘效应）。若无法立即读数，可将反应板避光保存于4℃，2小时内完成检测。

数据分析
根据标准品浓度梯度（0-1000pg/mL）绘制标准曲线，横坐标为浓度对数，纵坐标为OD值。通过四参数拟合（4PL）或线性回归计算样本中HRGβ1浓度。若样本OD值超出标准曲线范围，需用稀释液适当稀释后重新检测，最终浓度乘以稀释倍数。

质量控制
- 板内变异：复孔CV值应＜15%，若差异过大需检查加样误差或混匀步骤。
- 回收率：添加已知浓度HRGβ1的样本，回收率应在80%-120%之间。
- 空白对照：仅含稀释液的孔OD值应低于最低标准品的10%。

注意事项
- 试剂使用前需平衡至室温（25±2℃），避免冷凝水影响浓度。
- 洗板时需彻底拍干，残留液滴可能导致假阳性。
- 若显色过弱，可适当延长TMB孵育时间（不超过30分钟）。

‍应用示例
本试剂盒适用于血清、细胞上清或组织裂解液中HRGβ1的定量检测。例如，在研究肿瘤微环境时，可通过比较癌组织与正常组织的HRGβ1表达差异，分析其与血管生成的相关性。