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大鼠外周血树突状细胞(DC细胞)冻存的细胞该如何开始培养?
2022.06.22   点击65次

大鼠外周血树突状细胞(DC细胞)冻存的细胞该如何开始培养


  (1) 将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。


  (2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。


  (3) 将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。


  (4) 用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。以便保持抑制胰蛋白酶的活性用新的培养基重新悬浮细胞


  (5) 打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。


  (6) 用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。


  (7) 盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。


  (8) 将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)


  (9) 放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。


  大鼠外周血树突状细胞(DC细胞)完全培养基 高校合作商细胞培养过程中,多久更换一次培养基?


  这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。培养基可以正常使用


  注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。  ② 用吸管吹打形成细胞悬液后,分别接种到另外两到三个培养瓶中,置37℃培养箱中培养。



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