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辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒操作步骤
2021.11.24   点击118次

辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒操作步骤:

1、贴壁细胞的消化

①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变

化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。000~2000g 离心 min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

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