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高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)
高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)图片
产品介绍

   红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz小体等检测,高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用 Schumm法 ,其检测原理是在有足够的 NADPH存在下,高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白,当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的 NADPH的数量足以完成上述还原反应当红细胞内 G6PD含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原,高铁血红蛋白呈褐色,用分光光度计在 635nm波长处检测。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

试剂(A):抗凝剂5ml4℃
试剂(B): Hb Assay Buffer1.5ml4℃
试剂(C): Hb显色液1.5ml4℃避光
试剂(D): G6PD Buffer100ml4℃
使用说明书1份

自备材料:

1、离心管或试管

2、水浴锅或恒温箱

3、比色杯

4、分光光度计

操作步骤(仅供参考):

1、取新鲜静脉血 0.9ml,加入抗凝剂 0.1ml,充分混匀。

2、低速离心 15min,取出,调整血细胞与血浆比例为 1:1后再混匀。

3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer和 Hb显色液各 0.025ml,颠倒混匀 15次,使与氧气充分接触,加塞或密封后放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。混匀,取上述血液 0.02ml加入 G6PD Buffer 2ml。上述操作,可见下表:

加入物(ml)空白管测定管
抗凝血0.50.5
Hb Assay Buffer0.025
Hb显色液0.0250.025
混匀,放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。
取上述反应液0.020.02
G6PD Buffer22

4、混匀,室温放置 2min,比色杯光径 1cm,用分光光度计 635nm处测定空白管和测定管吸光度,分别命名为 SA和 B。

5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混匀,室温放置 5min,再次用分光光度计635nm处测定空白管吸光度命名为 ST。

计算:

高铁血红蛋白还原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100%

参考区间:一般应超过 75%

注意事项:

1、红细胞比容低于 30%时,高铁血红蛋白还原率显著下降,需调整红细胞与血浆的比例。

2、样本不应有凝血或溶血,以免影响测定。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

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