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Plus Mix
Plus Mix图片
品牌:东盛
产地:广州


包装与价格:
订货号纯度规格包装价格(元)
P203140次,50μl体系/次1 ml-
P2032200次,50μl体系/次1 ml×5-
产品名称
Plus Mix 浓缩PCR扩增预混和溶液
产品介绍

产品组分

 P2031
 2×Plus Mix 1ml 1支
 超纯水 1ml 1支
 P2032
 2×Plus Mix 1ml 1支×5
 超纯水 1ml 1支×5

注:本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品,PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。
 
保存条件
    -20℃保存1年。
    请勿保存于-70℃,防止反复冻融导致酶活降低。
 
产品说明
    Plus Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液,含有Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染(加样次数减少)。同时,由于体系内含有优化剂与增强剂,能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有两种末端:平末端与3'-dA。
    Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍,扩增片段的长度可达20 kb(简单模板)。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时,Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶,可用于复杂模板的PCR扩增。
 
产品特点
    使用方便:仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
    快速、高效:减少加样步骤,节约时间。
    可重复:降低污染和加样错误风险。
 
产品用途
    杂模板PCR扩增
    高通量复杂模板PCR扩增
    高重复性复杂模板PCR扩增
    制备TA克隆用PCR产物
 
活性定义
    一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
 
质量控制
    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,扩增活性无明显改变。
 
2×Plus Mix的组分
  100 mM KCl
  20 mM Tris-Cl
  3 mM MgCl2
  400 mM dNTP混合物
  0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酶
  溴酚蓝等
 
应用举例
注:以下反应举例为50 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。
 
以λDNA为模板,扩增1kb片段。

 λ DNA(2.5 ng/μl) 1μl
 Primer 1(10μM ) 2μl
 Primer 2(10μM) 2μl
 2×Plus Mix 25μl
 dd H2O 补足至50μl

 
反应条件

 95℃ 3 min
 95℃ 30 sec
 55~68℃ 30 sec  30 Cycles
 72℃ 1 min
 72℃ 5 min

 
备注
    1、建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。
    2、Plus Mix的扩增产物有两种末端:平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率,建议PCR产物纯化后,加A再进行TA克隆。
    3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)

 人类基因组DNA 0.1 – 1 μg
 λDNA 0.5 – 5 ng
 质粒DNA 0.1 – 10 ng
 大肠杆菌DNA 10 – 100 ng

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