产品描述

SC79是一种大脑渗透性Akt磷酸化激活剂，也是一种Akt-PH域易位抑制剂。

靶点（IC50 & Targe）

Akt

体外研究

SC79抑制PHAKTM/sub>-GFP血浆膜转位，并增强三个Akt亚型在HEK293，HeLa，HL60，NB4，和HsSulton (B 细胞)细胞中的磷酸化。SC79降低神经兴奋毒性，并防止中风诱导的神经元死亡。[1] SC79恢复BRAT1敲除细胞的增殖，并减少MitoSox阳性细胞线粒体中超氧化物的产生。[2]

体内研究

在永久性局部脑缺血小鼠模型中，SC79 (0.04 mg/g, i.p.)能够使细胞质中Akt活化，并重现Akt信号的初级细胞功能，从而增加神经元的存活。[1]

激酶实验

Akt细胞质磷酸化:

Hela细胞血清饥饿1小时，并用IGF (100ng/mL)或SC79 (4 μg/mL)处理30分钟。将细胞在裂解缓冲液中裂解，缓冲液包含250 mM 蔗糖，20 mM HEPES，10 mM KCl，1.5 mM MgCl2，1 mM EDTA，1 mM EGTA，并用蛋白酶抑制剂进行增补。细胞通过25G针头几次，并在冰上保持20分钟。这时候取走所有的细胞裂解物。细胞裂解物以100,000g离心30分钟。上层清液以胞质组分收集。沉淀用裂解缓冲液洗涤，代表细胞膜组分。总细胞裂解物，胞质和细胞膜组分用SDS-PAGE溶解，并通过免疫印迹分析磷酸-Akt (S473)，总Akt，微管蛋白(细胞质标记物)和Orai1 (细胞膜标记物)。

细胞实验

Cell lines: HsSultan 和 NB4 细胞

Concentrations: 8 μg/mL

Incubation Time: 24 h

Method:HsSultan或NB4细胞(2.5 × 105)接种在24孔板的500 μL无酚红RPMI培养基中，用10% FBS进行增补。培育24小时后，将各个化合物(8 µg/mL)加入，培养过夜(16–20 h)。将50 µL MTT溶液(5 mg/mL溶于PBS)接入每孔中。培育2小时后，紫色甲臜晶体通过直接加入500 μL异丙醇和0.1 M HCl到每个孔中溶解。通过离心分离清除细胞碎片后，在570 nm下测量吸光度。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 永久性局部脑缺血小鼠模型

Formulation: DMSO

Dosages: 0.04 mg/g

Administration: i.p.

(Only for Reference)

参考文献

[1] Jo H, et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012, 109(26), 10581-10586.

[2] So EY, et al. BMC Cancer. 2014, 14, 548.