产品描述

Torin 2 是一种有效的选择性mTOR抑制剂，在p53−/− MEFs细胞系中IC50为0.25 nM；作用于mTOR比作用于PI3K选择性高800倍，并且改善了药代动力学性能。抑制ATM/ATR/DNA-PK，在PC3细胞系中EC50分别为28 nM/35 nM/118 nM。

靶点（IC50 & Targe）

ATM,28nM(EC50)

ATR,35nM(EC50)

DNA-PK,118nM(EC50)

mTOR,0.25nM

体外研究

Torin 2与PI3Kγ具有相同的结合模式，V882作为铰链结合点，在内部疏水袋Y867，D841 和D964再提供三个作用于氨基比林侧链的氢键，类似于mTOR的Y2225，D2195 和D2357。[1] Torin 2抑制mTORC1，因此通过促进其核转运激活TFEB，EC50为1.666 mM。[2] Torin 2(< 50 nM)引起MZ-CRC-1和TT细胞的活性显著减少。Torin 2 (100 nM)使MZ-CRC-1和TT细胞的迁移显著减少。[3]

体内研究

在小鼠肝微粒体稳定性试验中，Torin 2表现出>95%的药效学响应，和11.7分钟的半衰期。Torin 2静脉内或口服给药后，在雄性Swiss albino小鼠体内表现出最好的生物利用度(51%)，短 的半衰期(0.72小时)和低清除率(19.6 mL/min/kg)。[1] 在Th-MYCN 小鼠体内，Torin 2(20mg/kg)消除MYCN肿瘤，减少MYCN蛋白质水平，并诱导细胞凋亡。[4]

激酶实验

mTOR 和 PI3K 细胞试验:

对mTOR的细胞IC50值使用p53−/− MEFs测定。细胞用载体或逐渐增减浓度的Torin 2处理1小时，然后裂解。S6K1 Thr-389的磷酸化使用磷酸-特异性抗体进行免疫印迹监测。同时，对PI3Ka的细胞IC50值，在p53−/−/mLST8−/−MEFs或表达S473D突变体Akt1的人PC3细胞中，基于Akt Thr-308的磷酸化进行测定。

细胞实验

Cell lines: MZ-CRC-1 和 TT 细胞

Concentrations: 50 nM

Incubation Time: 3 天或 5 天

Method: 对于活性测定，MZ-CRC-1和TT细胞以一式四份接种在96孔板(1.0×104细胞/孔)，培养基分别包含2.5%和4% FBS。24小时后，细胞用Torin 2处理。在指定时间点，细胞与10 μL CellTiter96 AQueous One溶液在100 μL培养基中培育3小时，吸光度在490 nm下测量。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 雄性 Swiss albino 小鼠

Formulation: 首先以25 mg/mL溶解在100% N-甲基-2-吡咯烷酮中，然后以1:4用无菌50% PEG400稀释，再用于注射

Dosages: 25 mg/kg

Administration: 静脉内或口服给药

(Only for Reference)

参考文献

[1] Liu Q, et al. J Med Chem, 2011, 54(5), 1473-1480.

[2] Settembre C, et al. EMBO J, 2012, 31(5), 1095-1108.

[3] Tamburrino A, et al. Clin Cancer Res, 2012, 18(13), 3532-3540.

[4] Berry T, et al. Cancer Cell, 2012, 22(1), 117-130.

[5] Liu Q, et al. Cancer Res, 2013, 73(8), 2574-2586.