氨基酸专用色谱柱专为分离与分析游离氨基酸而设计。填料为均一的球形颗粒,孔径为120 Å,比表面积为 300 m2/g。通过PITC 衍生化方法,18 种氨基酸可在氨基酸专用柱获得高分辨率的快速分析。
分析氨基酸的方法基于柱前衍生步骤,衍生化反应是在碱性条件下完成的,采用异硫氰酸苯酯和游离氨基酸反应生成的 PTC-氨基酸衍生物可于UV 254 nm 处被检测到。通过 PITC衍生法改善的氨基酸分离同样使其分析更有效。
避免在pH 低于2 或高于8 的条件下使用色谱柱,请尽量使用pH 在3~7.5 范围内的流动相。
尽管氨基酸专用柱可在高至4000 psi 的压力下使用,但正常的操作压力应当低于2500 psi。
最高操作温度为60℃ 。长时间在高温(>75℃)下操作也会损坏色谱柱,这种情形在高的pH(>8.5)条件下特别突出。
多次使用后某些样品中的杂质可能会吸附到入口筛板或填料上。当积累到一定程度时会出现压力升高并伴随峰形展宽的现象。出现这种情况时,推荐用5~80% 乙腈水溶液低流速梯度冲洗色谱柱5~10倍柱体积,结束后保存于乙腈与水的混合溶液中。
